奧林巴斯顯微鏡的正確使用方法
更新時間:2014-09-01 點擊次數(shù):522
首先是隨即選擇的熒光標本出現(xiàn)在Specimen Image窗口,奧林巴斯顯微鏡同時紫外-藍光-綠光的三帶通激發(fā)光濾光片組合(DAPI-FITC-TRITC)的光譜特征顯示在“濾光片組合”(Filter Set Spectral Profiles)欄下。通過選擇在“光譜交叉部分”(Spectral Cross Sections)下合適的check box(Absorption或Emission),熒光的吸收和發(fā)射光譜交叉的部分(濾光片投射帶通的重疊部分)就可以單一或者一起觀察了。當一個或者多個check box被激活時,組合的濾光片傳送和發(fā)射光譜會附加在用于標本熒光觀察的吸收和發(fā)射光譜(不包括自發(fā)熒光的植物標本)上。熒光吸收光譜在輔助區(qū)時用褐色填充的,而在相應的發(fā)射光光譜區(qū)用灰色填充的。濾光片組合的波長特征以較低的位置展示在黑色的長方形box內。這些數(shù)值常常根據(jù)滑塊從左到右轉換而更新。
為了操作這個輔助部分,使用Filter Set滑塊可以將三帶寬激發(fā)的兩個濾光片組合相互轉換。因為滑塊是由左至右滑動的,所以激發(fā)光和阻擋濾光片以及多色反光鏡的光譜會同時轉換。值得注意的是,持續(xù)轉換光譜并不意味著任何的濾光片組合都是可能的,也不意味單一的濾光片組合的光譜可以隨意改變。奧林巴斯顯微鏡在選擇的濾光片組合中改變光譜范圍很簡單,有助于在每一個光學模塊中的濾光片組合建立。
單一的濾光光譜(激發(fā)光,發(fā)射光和多色反光鏡)可以通過選擇和去除Filter Set Spectral Profiles下相應的check box來添加和刪除。除此之外,奧林巴斯顯微鏡熒光的吸收和發(fā)射光譜可以通過同樣的操作添加和刪除(Spectral Cross Sections)。觀察樣本的圖像會隨著濾光片的轉換而改變,反應出信號強度和對比度的變化;而這種變化是由滑塊移動引起濾光片組合產生的。一個新的目標樣本可以通過Choose A Specimen的下拉菜單隨時進行,奧林巴斯顯微鏡而用于觀察的熒光種類就列在下拉菜單中。在任何情況下,樣本都經過兩種或者多種熒光探針的染色,通過選擇的寬窄的帶通阻擋濾光片組合來觀察。